水稻愈伤组织培养过程
如何令水稻由种子状态转变为愈伤组织状态?该经验简介水稻经脱分化诱导出愈伤组织过程,为之后对水稻进行转基因操作做准备。主要经由水稻种子烘干、消毒、掐芽、掐块等步骤实现。
工具/原料
水稻种子
超净工作台
高压灭菌锅
培养皿、镊子、酒精灯等实验器械
培养基原料、75%的乙醇及有效浓度为5.5%的NaClO等实验药品
接种诱导:
1、将保存于-20摄氏度或4摄氏度冰箱中的种子取出置于37摄氏度恒温箱中烘烤10-20小时。
2、剥去种皮,用75%的乙醇及有效浓度为5.5%的NaClO依次消毒。
3、种子经无菌水清洗后吹干,然后接入诱导培养基中,并置于27摄氏度培养箱中培养。
掐芽:
1、7天后种子长出短小的芽和略微膨大的盾片,此时进行掐芽(摘去新长出的芽)处理并继续在原培养基中培养。
掐块:
1、接种大概15天左右掐块(留下长出的小粒愈伤,其余舍弃)并进行继代培养,15天后长出结构致密,光滑淡黄,直径大小约为2-3毫米的胚性愈伤组织颗粒。
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