姐妹染色单体分化染色实验

1、Brdu掺入：细胞培养24h后于培养液中加入Brdu，最终浓度10μg/ml，避光条件下继续培养;

2、待细胞经历两个细胞周期（48h），培养终止前4h加秋水仙素，秋水仙素终浓度为0.02μg/ml培养液；

3、常规制片，染色体制片在37℃恒温箱内老化24h；

4、紫外灯照射：取标本玻片置于大号培养皿内，正面朝上，上覆盖镜头纸，从玻片外镜头纸边沿加2×SSC液致使全镜头纸浸湿，移入60℃水浴锅内，紫外线灯距离5cm，照射30min；

5、染色：取出照射后标本，蒸馏水冲洗，置pH6.8的2%Giemsa染色10min。