选择压力分析方法
1、首先,基因的进化速率受到纯化(负)选择、突变和定向(正)选择等因素控制。为了检验选择压力对虾虎鱼亚目类群mtDNA的影响。
2、然后,通过Geneiousv.5.4对所得序列进行严格多重序列比对分析,然后利用DnaSP5.071与PAML18]软件,估算其非同义替换率(Ka)和同义替换率(Ks)的比值(Ka/Ks)。
3、然后,基因差异性分析,对mtDNA蛋白编码基因进行基因变异位点分析。先通过Ge艘绒庳焰neiousv.5.4软件,比对10种虾虎鱼亚目孺冖叛丶鱼类的蛋白编码基因,然后利用DnaSP5.0软件分析这些蛋白编码基因的变异位点与变异特征。
4、然后,系统发育学分析,选择压力分析与基因差异性分析结果,选择备选分子标记基因。先利用Geneious v.5.4 对所选基因序列进行严格多重序列比对分析,再以jModel Test 2。
5、然后,评估所有位点的最适置换进化模型,并以AIC(Akaikeinforma-tioncriterion)参数值评价所选模型的优劣。
6、最后,通过Neighborjoin坡纠课柩ing方法构建先验基因树,用Geneiousv.5.4和Megav.5.0进行最大椽榕硗巩似然法(MaximumLikelihood,ML)系统发育分析,自举支持度值(bootstrapanalysis)取1000。
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