用SDS 法小量提取植物基因的方法

1、首先，取新鲜豌豆叶片，放于用液氮预冷的研钵中研磨，要尽量细。

2、然后，取0.3 g 材料放于1.5 ml Eppendorf管中，加人600 pl 提取液，65C保温10 min。再以8 000 r/min 的转速离心10 min，取上清液。

3、然后，加入600 pl 氯仿，振荡，以13 000 r/min 的转速离心5 min。取上清液，加人2 倍体积的预冷的无水乙醇，再轻轻地颠倒混匀。

4、然后，在以13 000 r/min 的转速离心10 min。弃去上清液，用70%(V/V)乙醇洗涤沉淀两次，在室温风下干。

5、然后，将沉淀溶于30 pl 灭菌的双蒸水中，取10 ug植物基因组DNA，用10U特定限制性内切酶，37C消化8~12 h。

6、最后，在0.7%(V/V)的琼脂糖凝胶(含0.5 ug/ml溴化乙啶)，恒压电泳(电压<5 V,/cm)，检测基因组DNA 及酶切情况。