细胞学实验外包之脂质体介导DNA转染法

1、 细胞学实验外包中一个比较常见的实验就是细胞转染，而其中最为常用的转染方法就是脂质体介导DNA转染法，这种方法的好处就是作用范围广，COS-7、BHK、NIH3T3、Hela和Jurkat等任何一种细胞均可作为受体细胞。

2、 这个实验外包中所用的脂质体(lipofectinregeant,雉搽妤粲LR)试剂是阳离子脂质体N-[1-2，3-Dioleyoxy,Propyl]-n,n,n幻腾寂埒-TrimethylammoniumChloride(DOTMA)和Dioleoylphotidye-thanolamine(DOPE)的混合物[1:1(w/w)]。它适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前条件下最方便的转染方法之一。转染率高，优于磷酸钙法，比它高5～100倍，能把DNA和RNA转染到各种细胞。用LR进行转染时，首先需优化转染条件，应找出该批LR对转染某一特定细胞适合的用量、作用时间等，对每批LR都要做：第一，先要固定一个DNA的量和DNA/LR混合物与细胞相互作用的时间，DNA可从1～5μg和孵育时间6小时开始，按这两个参数绘出相应LR需用量的曲线，再选用LR和DNA两者最佳的剂量，确定出转染时间(2～24小时)。

3、 脂质体介导DNA转染法有一个非常重要的注意点，事实上LR对细胞有一定的毒性，因此转染时间以不超过24小时为宜，大家在选择这项实验外包技术时一定要注意了。