聚合酶链反应的方法

1、首先，分子生物学技术极大地推动了生物学科的发展，由于分子生物技术的不断发展和完善，分子生物学更加迅速广泛地渗透到生命科学的各个学科。分子生物学技术具有高度的特异性和高度的灵敏性等特点，为对虾病毒病的诊断和病毒的检测提供了新的手段。

2、然后，聚合酶链反应，PCR 是1983 年由美国Mullis 首先发现的。它是一种体外核酸扩增系统，在模板DNA，引物(模板片段两端的已知系列) 和四种脱氧核苷酸等存在的情况下，依靠TaqDNA聚合酶的催化，由高温变性，低温退火及适温延伸三个步骤组成一个周期，循环进行使模板DNA 得以扩增。

3、然后，进行原位杂交，原位杂交是利用放射性或非放射性标记的已知序列DNA 和RNA探针，在细胞或染色体上与其互补的核酸序列配对杂交，再经放射自显影或免疫荧光、化学发光，在杂交原位上显示杂交体的技术。

4、然后，进行点杂交，点杂交是将PCR 产物固定到尼龙膜上或硝酸纤维素滤膜上，用标记的与产物内部部分或全长核苷酸系列互补的探针进行点杂交，将未杂交的探针洗掉，通过杂交斑点的放射自显影，估计与样品核酸杂交的量。

5、然后，根据放射性映象的强度确定每一斑点的探针浓度，并同一系列对照作比较以确定核酸的浓度。

6、最后，许多分子生物学技术都可以用来巷佯袜瘫检测对虾的病毒，如PT-PCR 等方法。采用分子生物学技术检测对虾病毒，虽然仪器费用和操作技术要求高，但是灵敏度高和特异性高。随哉捐岳觥着分子生物学技术不断的发展和完善，把它作为一种检测对虾病毒手段，将会得到越来越普遍的使用。