重组质粒的电转化法

1、首先，将0.1cm的电击杯放在冰上进行预冷，冻存的感受态细胞取出冰上溶解。

2、然后，用100微升的感受态细胞加入1微升纯化的连接液，或者加入0.5微升未纯化的连接液，小心混匀，在冰上放置二十分钟。

3、然后，将混合液加入预冷的电击杯中，注意擦干杯外的水，防止电火花，放入电转化仪的反应槽内，接上电源。

4、然后，在3kv、200电阻和25微F的BioRad电转化仪，0.2电转化杯，时间常数在4.5-5ms之间，然后进行点击。

5、然后，在听到蜂鸣声后，向电击杯中迅速加入1ml37摄氏度的保温的SOC液体培养懋鲕壶迎基，将混合液洗出，转移到1.5ml的离心管中。

6、最后，在37摄氏度220-250r/min复苏培养一小时，使其充分表达抗性，取适量涂平板，将平板倒置在培养箱中，37摄氏度下培养16-24小时。