血涂片染色影响因素
1、准备好对应的载玻片、试剂等耗材,执行仪器开机,等待开机完成。
2、确认染色参数是否为默认参数(染薄本窭煌色时间5min、稀释比例1:10、稀释时间7min、干燥时间6min),如不满足调整参数至要求标准;
3、对收集好的全血样本手动混匀放置在进样处;
4、设置样本参数后进行推片染色;
5、第一次运行完成后进入染色参数设置处修改染色时间为1min,重复操作3和4;
6、仪器完成测试后,依次调整参数为稀释时间1min15s、稀释时间19min30s、稀释比麻质跹礼例1:5、干燥时间15min,重复操作3和4;(注:每次调整参数后其余参数应与默认参数保持一致)
7、仪器完成测试后将缓冲液置换为PH=7.2,重复操作3和4;
8、在仪器完成测试7的基础上通过设置不进行甲醇预固定,重复操作3和4;
9、所有测试完成后收集玻片依次进行显微镜观察,从体尾交界处寻找代表细胞并进行截图;
10、所有图片进行比对观察并分析。
11、整体对照图
12、染色时间对照
13、稀释比对照
14、稀释时间(降低)对照
15、稀释时间(升高)对照
16、干燥时间(升高)对照
17、缓冲液对照
18、实验总结:1.由染色时间对照组观察血涂片染色效果,染色时间从4min30s降为1min基本无影响;单核细胞、淋巴细胞颜色略浅,中性粒细胞胞质颗粒颜色略浅,但不影响观察效果;2.由稀释比对照组观察血涂片染色效果,稀释比例从1:10增加为1:5,染色颜色略加深,观察效果一般显著;3.由稀释时间2组对照观察血涂片染色效果,稀释时间的改变会明显影响细胞的染色效果,细胞核、细胞质及对应颗粒染色颜色与稀释液染色时间成正相关;4.从目前的观察,干燥时间的改变并未影响细胞染色效果;5.由缓冲液对照观察血涂片染色效果,PH值会明显影响细胞的染色效果,缓冲液偏碱会导致血涂片染色偏浅、染色偏蓝,导致部分细胞无法进行区分;