金黄色葡萄球菌检验方法

1、第一步：制备检测样品，在实验室按照无菌流程操作规范取待检样品（若是待检为固体样品则需要研磨）制成1:10样品混悬液（无菌水配制而成一般为25g（ml），加225ml无菌水）。需要计数检验时，进行稀释（可以以10倍递增稀释）。

2、第二步：菌种分离及培养，吸取5 mL混悬液，接种于7.5%氯化钠肉汤或胰酪胨大豆肉汤50 mL培养基内，36℃±1℃培养24 h，转种血平板和Baird-Parker平板， 36℃±1℃培养24 h，挑取血平板上金黄色（有时为白色）菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。

3、第三步：血浆凝固酶试验，吸取1:4新鲜兔血浆0.5 mL，放入小试管中，再加入培养24 h的金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤培养物0.5 mL，振荡摇匀，置 36±1℃温箱或水浴内，每半小时观察一次，观察6 h，如呈现凝固,即将试管倒置或 倾斜时，呈现凝块者，被认为阳性结果。同时以已知阳性和阴性葡萄球菌株及肉汤作为对照。

4、第四步：金黄色葡萄球菌快速检测方法，利用法国梅里埃公司生产的RPF培养基、API检测系统等。利用荧光免疫的方法检测葡萄球菌肠毒素，在仪器上45min可以得到结果。

5、第五步：动物学试验检测金黄色葡萄球菌肠毒素，主要利用幼猫和猴。

6、第六步：血清学试验，肠毒素作为抗原，可以和特异性抗体发生结合性反应，产生可见沉淀。用血清学反应检验金黄色葡萄球菌肠毒素。

7、请大家多多支持。