DC细胞的培养

1、从液氮灌里复苏一支PBMC或者是新鲜分离的PBMC。

2、加10ml 1640培养基培养在100mm平皿中，培养箱中放置4小时。

3、吸走悬浮细胞（PBLs）用DMSO冻存，贴壁细胞用PBS洗涤三次。

4、再用PBS将贴壁细胞吹下来，离心后用台盼蓝进行染色计数。

5、再细胞培养于6孔板中，同时加细胞因子GM-CSF和IL-4，浓度为1000IU/ml。

6、每隔一天半量换液，同时补加细胞因子。第6天时加入细胞因子TNF-a，继续培养到第8天，即为成熟的DC。能明显看到细胞表面树突状增多，细胞表面积增大。