采用组织分离法培育菌种要经过哪些步骤

1、磨菇、香菇、平菇、金针菇、猴头菇、竹荪等栽培食用菌,以及松乳菇、松茸等纯化中的食用攵沲跖演菌,均可采用组织分离法获得菌种,现以香菇为例说明组织分离法的主要步骤。

2、选择种菇按上述标准挑选种菇,采收后装入无菌纸袋内(忌用塑料袋)。

3、组织分离在无菌条件下,先用酒精棉球对菇体进行表面消毒,然后手持菌柄,将香菇撕成两半,取手术刀经火焰灭菌

4、冷却后,在菌盖、菌柄交界处挑取一小块(米粒般大小)菌肉,移植到PDA斜面上(事先洧粽袄淖配制并灭菌备用),即可转人培养观察阶段培养观察上述组织分离物在25℃条件下,经过3~5天即可看到分离物表面长出白色绒毛状菌丝,

5、呈星芒状在培养基上生长,培养期间,应每隔1~2天检查1次,随时淘汰霉菌或细菌污染的培养物。

6、培养10-15天后,再做1次转管培养,即可得到香菇母种,然后经栽培试验,确认其可以正常出菇后方可用于菌种生产和栽培。