wb的学习心得

2025-04-13 06:01:34

1、制胶,一般用10%的胶(分离胶)跑15KD到80KD的蛋白,浓缩胶用4%

2、跑胶,进胶的电压维持在120V左右最好,浓缩胶的电压在90V左右,分离胶的电压在120到150之间

3、转膜,我用的是干转,一般14分钟(蛋白分子量在25至80之间)

4、牛奶封闭1h(脱脂牛奶),最好现用现配

5、一抗孵育过夜,一般大于16h效果比较好

6、洗膜(1X TTBS洗2遍,1XTBS洗2遍)一般我洗8分钟1次

7、二抗孵育1h

8、洗膜(1X TTBS洗2遍,1XTBS洗2遍)一般我洗8分钟1次

9、扫膜

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