wb的学习心得
1、制胶,一般用10%的胶(分离胶)跑15KD到80KD的蛋白,浓缩胶用4%
2、跑胶,进胶的电压维持在120V左右最好,浓缩胶的电压在90V左右,分离胶的电压在120到150之间
3、转膜,我用的是干转,一般14分钟(蛋白分子量在25至80之间)
4、牛奶封闭1h(脱脂牛奶),最好现用现配
5、一抗孵育过夜,一般大于16h效果比较好
6、洗膜(1X TTBS洗2遍,1XTBS洗2遍)一般我洗8分钟1次
7、二抗孵育1h
8、洗膜(1X TTBS洗2遍,1XTBS洗2遍)一般我洗8分钟1次
9、扫膜
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