细菌芽胞染色法
芽孢壁厚、透性低,着色、脱色拨揞搠床均较困难。因此,用着色力强的染色剂(如孔雀石绿)在加热条件下进行染色时,染料不仅可以进入菌体,而且也可以进入芽孢,进入菌体的染料可经水洗脱色,而进入芽孢的染色的染料则难以透出,若再用复染液(如沙黄水溶液)染色后,芽孢仍然保留初染剂的颜色,而菌体被染成复染剂的颜色,即菌体和芽孢分别染成红色和绿色易于区分。
工具/原料
酒精灯、接种环、载玻片、炭疽芽胞杆菌、石炭酸复红染液、碱性美蓝染液、95%酒精等。
1.细菌涂片制备:
1、用炭疽芽胞杆菌斜面培养物涂片,干燥后经火焰固定。
2.细菌涂片染色:
1、(1)初染:于制好的涂片上滴加石炭酸复红染液,用微火加热,使染液冒蒸气(切勿煮沸),持续约5min,加热过程中要随时添加染液,勿让标本干涸,冷却后用水冲洗。
2、(2)脱色:用95%酒精脱色约1min,水洗。
3、(3)复染:加碱性美蓝染液染色1min,水洗,干后镜检。
4、结果观察:芽胞染成红色,菌体呈蓝色。
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